Die Fluorimetrie (oder Fluoreszenzspektroskopie; siehe auch Fluoreszenzspektrum, Fluoreszenz) ist ein optisches, analytisches Verfahren, das vor allem zur quantitativen Bestimmung eingesetzt wird. Dabei wird die Fluoreszenz eines Stoffes oder die Verringerung der Floureszenz durch Fluoreszenzlöschung („Quenching“) erfasst.
Grundlagen
Bearbeiten
Fluorophore
BearbeitenAromatische und konjugierte Doppelbindungssysteme, Carbonylverbindungen und kondensierte Heterocyclen zeigen oftmals Fluoreszenz. Planare Moleküle fluoreszieren wahrscheinlicher, als diejenigen die einen räumlichen Aufbau besitzen.
Messgeräte (Fluorimeter)
Bearbeiten
Mit Hilfe eines Fluorimeters wird die Fluoreszenzintensität (Emissionsspektrum) registriert. Ein Photomultiplier kann zur Detektion verwendet werden. Die Messung der Fluoreszenzintensität erfolgt im 90 ° Winkel zum einfallenden Licht, da sonst die Gefahr besteht, dass das einfallende Licht die Messung beeinflusst. Das verwendete Leuchtmittel muss Licht aussenden, das das Fluorophor anregt. Da Xenon viele Spektrallinien aufweist, wird es häufig eingesetzt. Die Monochromatoren können unterschiedlich beschaffen sein. Denkbar wären Prismen, Gitter und Interferenzfilter bzw. dichroitische Spiegel.
Kombinationsgerät (gleichzeitige Messung von Absorption und Emission)
BearbeitenBeim kombinierten Gerät kann die Absorption zeitgleich mit der Fluoreszenzemission gemessen werden. Der Absorptionsmonochromator wird auf die Wellenlänge(n zur Aufnahme von Spektren) des einfallenden Lichts eingestellt.
Einfaches Gerät (Messung der Emission)
Bearbeiten
Das einfache Gerät misst nur die Lichtemission. Die Lichtemission ist dann am größten, wenn Licht geeigneter Wellenlänge auf das Fluorophor trifft (Änderungen am Anregungsmonochromator). So lässt sich auch das Absorptionsmaximum annähernd bestimmen, wenn man eine ungefähre Vorstellung der Wellenlänge des emittierten Lichts hat. Ist das Absorptionsmaximum gefunden, kann die Emission bei dieser Wellenlänge untersucht werden.
Anwendung
BearbeitenAnwendung in der Pharmazie
BearbeitenIn der Pharmazie wird die Fluorimetrie zur Identitätsprüfung, Reinheitsprüfung und zur Gehaltsbestimmung von Arzneimitteln eingesetzt.[1]
Anwendungen in weiteren Bereichen
BearbeitenAuch in der Biologie und der Chemie ist die Fluorimetrie ein geläufiges Verfahren.
In der Technik werden Fluoreszenzmesser bei der Fabrikationskontrolle von Leuchtstoffen eingesetzt.[2]
Einzelnachweise
Bearbeiten- ↑ Gerhard Rücker; Michael Neugebauer; Günter Georg Willems: Instrumentelle pharmazeutische Analytik - Lehrbuch zu spektroskopischen, chromatographischen, elektrochemischen und thermischen Analysenmethoden. 2. Auflage. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbH, Stuttgart 1992, ISBN 3-8047-1222-3
- ↑ Prof. Dr.-Ing. Erich Lüder: Kleine Enzyklopädie Technik. 5. Auflage. VEB Bibliographisches Institut Leipzig, 1966