Diskussion:Klenow-Fragment

Das Klenow Fragment besitzt keine Exonucleaseaktivität... Das ist der einzige Grund weshalb man dieses Fragment überhaupt benutzt... Quelle T.A. Brown, 5. Aufl. 2007 S.64f

Das ist so nicht ganz richtig. Das Klenow-Fragment besitzt neben der Polymerase-Aktivität auch eine 5'→3' Exonuklease-Aktivität. Nur die 3'→5' Exonuklease-Aktivität der DNA-Polymerase I fehlt (siehe auch hier). Viele Grüße, --Hoffmeier 12:00, 24. Feb. 2008 (CET)Beantworten

Sorry, natürlich andersrum. Also 3'→5' Exonuklease-Aktivität (Proofreading), aber keine 5'→3' Exonuklease-Aktivität. --Hoffmeier 22:30, 14. Mai 2008 (CEST)Beantworten

Mit Hilfe einer Proteasebehandlung (Trypsin) lässt sich die DNA-Polymerase I von Prokaryoten in folgende Bestandteile spalten: 5´3´-Exonuklease und das Klenow-Fragment (Polymerase und 3´5´-Exonuklease)! Quelle: R. Knippers, 9 Auflage S. 178 (steht auch so in anderen Lehrbüchern!)

Nick Translation

Letzter Kommentar: vor 15 Jahren3 Kommentare3 Personen sind an der Diskussion beteiligt

Für die Nick-Translation werden meiner Meinung nach beide Funktionen des Klenow Fragmentes benötigt, da nur ein Einzelstrangbruch vorhanden ist, müssen die Nukleotide durch Exonukleseaktivität in 3'-5' entfernt werden und daraufhin durch (markierte) Nukleotide ersetzt werden -- 92.227.78.252 15:26, 27. Sep. 2009 (CEST)Beantworten

Das Klenow-Fragment besitzt keine 5'-3' Exonukleasefunktion mehr. Deshalb kann es auch nicht für die Nick-Translation verwendet werden. Der ursprüngliche Satz, sowie die "Korrektur" vom 27.09. sind wohl falsch. Habe aber selbst noch keine Nick-Translation durchgeführt... --Jann 21:30, 5. Okt. 2009 (CEST)Beantworten

Jepp, völlig richtig. --Hoffmeier 03:04, 6. Okt. 2009 (CEST)Beantworten

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